대청호오백리길 자원봉사활동은 매월 셋째주 토요일에 정기적으로 실시되며, 매회 20명의 자원봉사자를 모집한다. 신청을 하고자 하는 청소년이나 일반인은 자원봉사 사이트(http://dovol.youth.go.kr)에 접속한 후 대전지역 개인 참여 봉사활동 페이지를 통해 신청이 가능하다.
행사 참가자들은 쓰레기 치우기, 잡초제거 등 환경정화 활동과 대청호오백리길 홍보 및 개선방향 제안 등 다양한 역할을 수행하게 된다.
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